Preparasyon echantiyon:
Koleksyon Egzanp: Kolekte echantiyon tankou san, tisi, krache, ak pipi dapre bi eksperyans lan.
Ekstraksyon ADN: Sèvi ak yon twous dedye ADN fè ekstraksyon ekstrè ADN nan echantiyon an.
Preparasyon reyaksyon PCR:
Primè Design: Design pè Jadendanfan espesifik ki baze sou sekans lan sib pou anplifikasyon nan ADN modèl.
Prepare melanj reyaksyon: ki gen ladan ADN modèl, prime, zòn de defans, polymerase ADN, DNTPs (deoxynucleoside trifosfat), mg 2+, elatriye.
Mete pwogram PCR:
Anviwònman enstriman PCR: Antre paramèt yo prereglaj PCR sik, tankou 95 degre tanperati prechofe, tanperati denaturasyon (tankou 95 degre), tanperati rkwir (tankou 55 degre), tanperati ekstansyon (tankou 72 degre), ak kantite sik.
Reyaksyon PCR:
Add echantiyon: Ajoute melanj lan reyaksyon nan tank la reyaksyon PCR oswa chip, epi chak echantiyon anjeneral gen yon sèl reyaksyon byen.
Fè PCR: sik la enstriman PCR dapre pwogram prereglaj la, ki gen ladan chofaj, refwadisman, rkwir, ak etap ekstansyon.
Analiz pwodwi:
Refwadisman Apre anplifikasyon: Apre PCR fini, se echantiyon an yon ti tan refwadi nan 4 degre.
Separasyon electrophoretic: Sèvi ak teknoloji jèl elèktroforèz, tankou elèktroforèz jèl agarose, separe pwodwi PCR nan longè diferan.
Fluoresans optik: prime fluorescent ki make emèt limyè nan yon longèdonn espesifik nan pwodwi a anplifye, ak enstriman an PCR li siyal sa yo ak dosye yo.
Done pwosesis ak entèpretasyon:
Done analiz lojisyèl: Sèvi ak lojisyèl espesyalize yo analize siyal la fliyoresan ak kalkile konsantrasyon an oswa konsantrasyon relatif nan fragman nan sib.
Entèpretasyon Rezilta: Baze sou koub la PCR ak debaz, detèmine si PCR a gen siksè, si fragman nan sib egziste, ak konbyen li ye.
Rezilta anrejistreman ak prezèvasyon:
Ekri rezilta yo nan rapò eksperimantal la ak byen prezève done orijinal yo ak echantiyon yo.